常见问题_上海浦芥生物技术有限公司

构建亚细胞定位载体时，目标蛋白连在荧光蛋白的N端更好，还是C端更好？

答：大部分文献的亚细胞定位载体一般都是把目标蛋白连在N端，GFP放在C端；如果目标蛋白连在C端，在加工过程中有可能信号肽会连同GFP一起被切掉，导致荧光淬灭，或荧光信号弱。也有少部分目标蛋白必须连在C端才有信号。极少的目标蛋白需要连入GFP中间才有信号。融合在荧光蛋白N端的目标蛋白一般无法得到过氧化物酶体的定位结果，融合在荧光蛋白C端的目标蛋白一般无法得到线粒体、质体的定位结果。选择融合位置时需考虑蛋白质的性质和功能，有时可能需要尝试两种方式以确定最佳融合位点。

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