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为什么有些基因预测互作且在酵母双杂中显示互作,但BiFC结果显示无信号?

2025/3/11


答:由于在酵母双杂实验中BD融合诱饵蛋白有单独激活作用,且AD融合靶蛋白如果有DNA的特异性结合,也可以单独激活报告基因的表达,导致最后的实验结果出现假阳性。有些重组还可能会破坏蛋白之间的互作,且不同外源基因的瞬时表达效率大不相同,建议在BiFC之前先做个亚细胞定位评价一下两个基因的表达效率,以便调整两个质粒的转化条件。