常见问题
答：可能的原因有多种。首先，确认载体是否有问题，荧光蛋白选择是否合适，融合蛋白设计有无缺陷，甚至可以对调N端和C端的目的基因。其次，有些基因表达时间长，在原生质体中表达不明显，可以尝试在烟草体系中表达，且适当调节观察时间，以便观察到更明显的结果。同时，确定激光共聚焦显微镜观察是否有失误。此外，烟草状态不佳也可导致农杆菌侵染效率低，蛋白表达弱，进而影响荧光信号。浦芥生物常年供应烟草活体苗，可联系相关负责人15301627726索取。
针对无信号的情况解决方法有：① 建议优化、升级载体系统，并检查融合蛋白的表达情况；② 优化、调整实验体系，延长培养时间，增加菌液浓度，提高乙酰丁香酮用量。③ 在制片过程中，应彻底清理干净叶片表面杂质，排除气泡，以减少背景干扰。④ 适当调节观察时间，分时段检测（24h/48h/72h），弱表达蛋白需延长至96小时。如果以上原因都已验证排除，还是没有荧光信号，可能是所研究的蛋白质之间确实不存在相互作用，因此无法形成完整的荧光蛋白。
更多
推荐资讯
-
2025-03-112025年春季促销活动-浦芥生物
-
2025-03-11构建亚细胞定位载体时，目标蛋白连在荧光蛋白的N端更好，还是C端更好？
-
2025-03-11做烟草瞬时转化，是否有现成的本氏烟草苗？
-
2025-03-11是否有现成的野生型拟南芥苗？
