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如何获得烟草无菌苗？

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2025/3/11 浏览次数：

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问：如何获得烟草无菌苗？

答：获取烟草无菌苗的步骤如下：

(1) 取保存的野生型烟草种子，倒入1.5ml的离心管中，每管种子量不超过200μl。

(2) 向离心管中加入1ml的 75％乙醇，震荡1min，用移液器小心地移除液体。

(3) 向离心管中加入1ml的5%次氯酸钠溶液（即次氯酸钠原液与无菌水体积比1:19），震荡8-10min，用移液器小心地移除液体。

(4) 向离心管中加入1ml的无菌去离子水ddH2O，震荡后移除液体，重复5次，留取最后一次无菌水。

(5) 用剪掉尖头的1ml无菌枪头，吹打带水种子，吸取到干燥的无菌滤纸上。

(6) 待水稍干以后，用无菌镊子取烟草种子点种到已经晾干的播种培养基平板上。

(7) 用封口膜封好培养皿，写好标签，放至组织培养室（23℃-26℃），培养5-7d，种子即萌发。

(8) 在培养室培养 14d，幼苗长出两片真叶以后，可移栽烟草盆栽苗。

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