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如何获得拟南芥无菌苗？

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2025/3/11 浏览次数：

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问：如何获得拟南芥无菌苗？

答：拟南芥无菌苗获取步骤如下：

1. 取保存的拟南芥种子适量，倒入1.5ml的离心管中，加入无菌水，震荡数次，高速离心15s，将上清及漂浮的种子弃掉。

2. 向离心管中加入1ml的 70％乙醇，震荡10s，用移液器小心地移除上清。

3. 向离心管中加入1ml的无菌去离子水ddH2O，震荡后吸除，重复两次。

4. 向离心管中加入1ml的3％次氯酸钠溶液，在涡旋振荡器上强力震荡10min，用移液器小心地移除上清。

5. 向离心管中加入1ml的无菌去离子水ddH2O，震荡后吸除，重复3次以上。

6. 向离心管中加入500μl的无菌去离子水ddH2O，震荡后，将种子倾倒在含有无菌滤纸的培养皿中。

7. 待水稍干以后，用小镊子取拟南芥种子点种到已经晾干的MS培养基平板上。

8. 用封口膜封好培养皿，写好标签。

9. 将封好的平板放到4℃的冰箱2-3d，进行春化处理，打破种子休眠期。

10. 将春化处理后的平板放入组织培养室（22℃-23℃），培养3-4d，种子即萌发。

11. 在培养室培养 7-10d，幼苗长出两片真叶以后，即可移栽到土里获得拟南芥植株。

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