1937

种苗

2020/3/26

拟南芥Col-0种子

产品规格

货号

名称

规格

保存条件

AS5001

拟南芥Col-0种子

0.2ml/, 0.5ml/, 1ml/

4

产品说明

拟南芥(Arabidopsis thaliana) 属于十字花科是二年生草本植物在生物实验中拟南芥经常被选择作为模式植物,原因有三:首先,拟南芥只有5对染色体,数目很小;其次,拟南芥发育生长周期极快,在短期内就能繁育很多代,满足变异和进化的要求,最后拟南芥每次生产数千枚种子满足遗传上统计的要求。拟南芥的基因组是目前已知植物基因组中最小的大约为12500万碱基对。拟南芥植株小、结子多、自花受粉,基因高度纯合,并且种植方便,生长周期短,条件易得,遗传转化方法简单,是进行遗传学研究的理想材料,被科学家誉为“植物中的果蝇”。拟南芥无菌培养,普遍使用的是1倍或0.5倍浓度的MS培养基,也有使用GamborgB5培养基。

操作方法

1. 取保存的野生型种子适量,倒入1.5ml的离心管中,加入无菌水,震荡数次,高速离心15s,将上清及漂浮的种子弃掉。

2. 向离心管中加入1ml70%乙醇,震荡10s,用移液器小心地移除上清。

3. 向离心管中加入1ml的无菌去离子水ddH2O,震荡后吸除,重复两次。

4. 向离心管中加入1ml3%次氯酸钠溶液,在涡旋振荡器上强力震荡10min,用移液器小心地移除上清。

5. 向离心管中加入1ml的无菌去离子水ddH2O,震荡后吸除,重复3次以上。

6. 向离心管中加入500μl的无菌去离子水ddH2O,震荡后,将种子倾倒在含有无菌滤纸的培养皿中。

7. 待水稍干以后,用小镊子取拟南芥种子点种到已经晾干的MS培养基平板上。

8. 用封口膜封好培养皿,写好标签。

9. 将封好的平板放到4的冰箱2-3d,进行春化处理,打破种子休眠期。

10. 将春化处理后的平板放入组织培养室(22-23),培养3-4d,种子即萌发。

11. 在培养室培养 7-10d,幼苗长出两片真叶以后,即可进行大量移栽。

注意事项

1. 因幼苗长出真叶后即可移栽,MS培养基的蔗糖含量控制在1-2%即可。

2. 70%乙醇进行种子表面消毒时,时间不宜过长,因为拟南芥种皮较薄,乙醇极易渗入,杀伤种子。

3. 点种种子时,避免种子挤到一起,防止根交错到一起。

4. 如果种子收获后超过3个月,可以不用进行春化处理。

5. 放置培养皿时,前几天可以倒置放置,当根生成后改为平放,防止根向上生长。

6. MS培养基可用B5培养基代替。