2020/3/26
拟南芥Col-0种子
● 产品规格
货号 |
名称 |
规格 |
保存条件 |
AS5001 |
拟南芥Col-0种子 |
0.2ml/支, 0.5ml/支, 1ml/支 |
4℃ |
● 产品说明
拟南芥(Arabidopsis thaliana) 属于十字花科,是二年生草本植物,在生物实验中拟南芥经常被选择作为模式植物,原因有三:首先,拟南芥只有5对染色体,数目很小;其次,拟南芥发育生长周期极快,在短期内就能繁育很多代,满足变异和进化的要求,最后拟南芥每次生产数千枚种子满足遗传上统计的要求。拟南芥的基因组是目前已知植物基因组中最小的,大约为12500万碱基对。拟南芥植株小、结子多、自花受粉,基因高度纯合,并且种植方便,生长周期短,条件易得,遗传转化方法简单,是进行遗传学研究的理想材料,被科学家誉为“植物中的果蝇”。拟南芥无菌培养,普遍使用的是1倍或0.5倍浓度的MS培养基,也有使用GamborgB5培养基。
● 操作方法
1. 取保存的野生型种子适量,倒入1.5ml的离心管中,加入无菌水,震荡数次,高速离心15s,将上清及漂浮的种子弃掉。
2. 向离心管中加入1ml的 70%乙醇,震荡10s,用移液器小心地移除上清。
3. 向离心管中加入1ml的无菌去离子水ddH2O,震荡后吸除,重复两次。
4. 向离心管中加入1ml的3%次氯酸钠溶液,在涡旋振荡器上强力震荡10min,用移液器小心地移除上清。
5. 向离心管中加入1ml的无菌去离子水ddH2O,震荡后吸除,重复3次以上。
6. 向离心管中加入500μl的无菌去离子水ddH2O,震荡后,将种子倾倒在含有无菌滤纸的培养皿中。
7. 待水稍干以后,用小镊子取拟南芥种子点种到已经晾干的MS培养基平板上。
8. 用封口膜封好培养皿,写好标签。
9. 将封好的平板放到4℃的冰箱2-3d,进行春化处理,打破种子休眠期。
10. 将春化处理后的平板放入组织培养室(22℃-23℃),培养3-4d,种子即萌发。
11. 在培养室培养 7-10d,幼苗长出两片真叶以后,即可进行大量移栽。
● 注意事项
1. 因幼苗长出真叶后即可移栽,MS培养基的蔗糖含量控制在1%-2%即可。
2. 用70%乙醇进行种子表面消毒时,时间不宜过长,因为拟南芥种皮较薄,乙醇极易渗入,杀伤种子。
3. 点种种子时,避免种子挤到一起,防止根交错到一起。
4. 如果种子收获后超过3个月,可以不用进行春化处理。
5. 放置培养皿时,前几天可以倒置放置,当根生成后改为平放,防止根向上生长。
6. MS培养基可用B5培养基代替。
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